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Tris-HCl/HEPES緩沖液應用對比

更新時間:2022-05-12   點擊次數:1818次

常用的緩沖液有很多,如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大,今天主要來對比兩種常用的緩沖液:Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應用對比


1、Tris-HCl緩沖液的應用


Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系,穩定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH 7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫藥、涂料以及合成中均有應用。應用于體內時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強。


①Moderna核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)

將SM-102、DSPC、膽固醇以及PEG脂質與溶于pH 5.0乙酸鹽緩沖液中的mRNA以2.5:1(脂質:mRNA)的比例混合,再將混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作為冷凍保護劑,最后將制備得到的溶液進行無菌過濾,-70℃下冷凍保存準備進一步使用。


處方:

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②恩利(注射用依那西普,Enbrel)

Enbrel是一個全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑,是暢銷的藥物之一。

輔料:甘露醇,蔗糖,氨丁三醇(Tris)


2、HEPES緩沖液的應用


HEPES緩沖液對細胞無毒性作用,它是一種氫離子緩沖劑,能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L,一般培養液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質體藥物等方面均有應用。


①Onivyde® -伊立替康脂質體

是一種拓撲異構酶抑制劑,與氟尿嘧啶和甲酰四氫葉酸組合,用于治療基于吉西他濱治療后疾病進展的胰腺轉移性腺癌患者,為晚期大腸癌的一線用藥,也可用于術后的輔助化療;對肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也有一定療效。


處方:

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Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液都是生物制劑中常用的緩沖液,如何選擇需要結合制劑本身的特性和處方優化的需求綜合考量。





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